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產(chǎn)品說明
耐熱細(xì)菌SSB為熱穩(wěn)定蛋白，來源于嗜熱細(xì)菌，是細(xì)菌DNA 復(fù)制和修復(fù)所必需的一種單鏈 DNA（ssDNA）結(jié)合蛋白，具有ssDNA結(jié)合活性。耐熱細(xì)菌SSB結(jié)合并穩(wěn)定瞬時形成的 ssDNA 區(qū)域，在細(xì)菌DNA復(fù)制過程中起著重要的結(jié)構(gòu)性作用。SSB被廣泛地用于標(biāo)記和穩(wěn)定 ssDNA 區(qū)域，以便用電子顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)存在的 ssDNA結(jié)構(gòu)。最新報道表明SSB蛋白可以提高RT-PCR 中反轉(zhuǎn)錄的效率、促進(jìn)限制性內(nèi)切酶的消化反應(yīng)、增強T4 DNA 聚合酶的活性和提高 PCR 的產(chǎn)量。
本公司耐熱細(xì)菌SSB 是重組表達(dá)，并經(jīng)多步純化的重組蛋白，分子量約為29 kDa的蛋白質(zhì)，與T4 SSB具有相同的應(yīng)用效果，并具有很好的熱穩(wěn)定性，尤其適合于高溫反應(yīng)。
活性定義
本品按純蛋白質(zhì)量銷售。
濃度：5mg/ml
保存條件：-20℃保存
特點
? 在 RT-PCR 過程中，增加反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量和延伸能力；
? PCR時，增加目的片段的產(chǎn)量和特異性；
? 穩(wěn)定和標(biāo)記 ssDNA 結(jié)構(gòu)；
? 熱穩(wěn)定性好，耐受75°C保溫30分鐘，活性未見損失。
? 適用于所有PCR buffer、等溫核酸擴(kuò)增buffer。
適用范圍
? PCR、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)、體外RNA轉(zhuǎn)錄；
? 其它需要結(jié)合ssDNA的實驗。
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
Component | AE1902A | AE1902B | AE1902C |
耐熱細(xì)菌SSB | 0.2mg | 1mg | 4mg |
質(zhì)量控制
相關(guān)測試表明無外源內(nèi)切、外切脫氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法檢測無宿主殘余DNA。
酶貯存緩沖液
20 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，0.5 mM DTT，1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 8 @ 25°C。
相關(guān)產(chǎn)品：
Taq DNA聚合酶、忠實性DNA聚合酶等各種PCR酶、Bsu DNA聚合酶（大片段）等
使用實例：
1、降低PCR的引物二聚體
1）在冰上按下表配制反應(yīng)體系
反應(yīng)組分 | 體積或濃度 |
10×PCR Buffer | 5ul |
Tth SSB | 1-2ul |
引物-F（10uM） | 1.5 |
引物-R（10uM） | 1.5 |
DNA template | 10-100ng |
Taq酶(5U/μl) | 0.5ul |
H2O | Y ul |
總體積 | 50ul |
2）PCR反應(yīng)，
3）瓊脂糖電泳檢測擴(kuò)增產(chǎn)物，或按實驗?zāi)康倪M(jìn)行后續(xù)操作。
警告: 本產(chǎn)品僅限科研實驗使用，臨床應(yīng)用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫(yī)療臨床診斷。
注意事項
l 反轉(zhuǎn)錄實驗應(yīng)該遵守RNA操作規(guī)則，并添加RNase Inhibitor。
l 95°C半衰期為8分鐘，72度保溫2小時未見明顯失活。
