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產(chǎn)品說明
Tth Nucleoside diphosphate kinase是一種熱穩(wěn)定核苷二磷酸激酶，來自于嗜熱細菌菌Thermus thermophilus, 該酶不僅催化腺苷三磷酸（ATP）和核苷二磷酸（NDP）之間高能磷酸基團的轉(zhuǎn)移，還具有NDP激酶活性和蛋白磷酸轉(zhuǎn)移酶活性，并參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控和信號轉(zhuǎn)導。本酶具有很好的耐熱性，在最適溫度60-75℃范圍內(nèi)，其在細胞內(nèi)負責合成除ATP以外的其它核糖核苷酸，由核糖核苷二磷酸生成核糖核苷三磷酸：(d)XDP+(d)YTP→(d)XTP+(d)YDP。該酶比活為1×105 U/mg，包裝濃度約100 ng/μl。
本公司核苷二磷酸激酶是重組表達，并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。
活性定義
1活性單位指在65℃下，1×核苷二磷酸激酶反應緩沖體系下，在10mM ATP、1mM UDP存在條件下，每分鐘轉(zhuǎn)化1.0 μmole UDP生成UTP所需酶量。
活性測定條件
1× NDPK Buffer：20 mM HEPES，pH7.5，100 mM Potassium glutamate，10 mM Magnesium acetate，5mM DTT。
濃度：10U/μl
保存條件：-20℃可保存2年，避免反復凍融
特點
? 本酶為熱穩(wěn)定性蛋白，能夠耐受70-75℃反應溫度
適用范圍
? 酶法合成各種核苷三磷酸
? 蛋白磷酸化
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
Component | AE1003A | AE1003B |
核苷二磷酸激酶 | 500U | 2500U |
10 × NDPK Buffer | 0.3ml | 1.5ml |
質(zhì)量控制
經(jīng)過嚴格的質(zhì)控檢測，確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。
酶貯存緩沖液
20mM Tris-HCl，200mM NaCl，5mM DTT，50% Glycerol，pH7.5
使用實例：
1）按下表配制反應體系
反應組分 | 體積或濃度 |
10×Buffer | 2ul |
底物NDP | 2mM |
酶(10U/μl) | 1-2ul |
H2O | X ul |
總體積 | 20ul |
2）60℃×30min反應，
3）HPLC或薄板層析檢測產(chǎn)物，或按實驗目的進行后續(xù)操作。
警告: 本產(chǎn)品僅限科研實驗使用，臨床應用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫(yī)療臨床診斷。
注意事項
l 不能完全熱失活
