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UvsY是一種噬菌體T4 重組調(diào)節(jié)蛋白，通過結(jié)構(gòu)學(xué)和生物物理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)重組調(diào)節(jié)蛋白在UvsX執(zhí)行同源重組過程中起到促進(jìn)作用。在UvsX尋找同源序列時，它需與預(yù)結(jié)合在單鏈DNA上的單鏈DNA結(jié)合蛋白SSB競爭結(jié)合位點，而UvsY蛋白促進(jìn)這種競爭，有助于UvsX與單鏈DNA的結(jié)合。 UvsY蛋白分子量為~16KDa，它可增強(qiáng)UvsX蛋白的依賴于DNA的ATPase的活性，降低其發(fā)揮活性所需的最低濃度，從而促進(jìn)鏈置換。UvsY促進(jìn)UvsX重組酶侵入ssDNA-單鏈結(jié)合蛋白復(fù)合物，導(dǎo)致單鏈結(jié)合蛋白的釋放，從而UvsX與單鏈DNA的結(jié)合。
本公司T4 uvsY recombination protein是重組表達(dá)，并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。
濃度：1ug/μl
保存條件：-20℃可保存2年，避免反復(fù)凍融
特點與適用范圍
? RPA擴(kuò)增
? 基因檢測
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
Component | AE1652A | AE1652B |
T4 uvsY recombination protein | 100ug | 500ug |
質(zhì)量控制
經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測，確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。
酶貯存緩沖液
50 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，20% Glycerol，pH 7.5。
相關(guān)產(chǎn)品
T4 SSB （AE1904）、Bsu DNA polymerase（大片段，AE0611）、T4 uvsX（AE1651）
應(yīng)用實例
RPA等溫DNA擴(kuò)增
1）按下表配制反應(yīng)體系
反應(yīng)組分 | 體積/ul |
10× RPA Buffer | 5 |
2 mM dNTP | 5-10 |
模板DNA | 100ng |
Primer-F（10uM） | 5 |
Primer-R（10uM） | 5 |
T4 SSB | 1 |
T4 uvsY | 1 |
T4 uvsX | 1 |
Bsu DNA polymerase 大片段(5U/ul) | 1 |
H2O | Variable |
總體積 | 50 |
2） 30-37℃保溫30-60min；
3）瓊脂糖電泳檢測擴(kuò)增結(jié)果
4）按需進(jìn)行后續(xù)實驗，例如進(jìn)行DNA合成反應(yīng)。
警告: 本產(chǎn)品僅限科研實驗使用，臨床應(yīng)用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫(yī)療臨床診斷。
注意事項
l 對于不同的DNA片段的RPA擴(kuò)增反應(yīng)，各個蛋白組分的比例與濃度需要優(yōu)化
