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| 產品代碼 | 規格 | 價格 | 數量 | 購物車 |
| AE2206A | ￥ |
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產品說明
本RecJ核酸酶來源于耐熱古細菌，不同于細菌RecJ核酸酶。本酶作用于單鏈DNA和單鏈RNA，沿 3′ →5′ 方向水解ssDNA和ssRNA，生成3’-OH的單鏈DNA、單鏈RNA、單核苷酸。且單鏈RNA水解活性高于單鏈DNA底物。本酶具有很好的熱穩定性，95度半衰期達15分鐘，在60-85度都有較高活性，對NaCl耐受度較低，高于50mM NaCl嚴重抑制酶活性。
本公司RecJ nuclease是重組表達，并經多步純化制備的重組酶。
活性定義
1單位指在溫度為50℃，1× RecJ Nuclease 反應緩沖體系的條件下，30 min內水解單鏈DNA產生50pmol溶于三氯乙酸的脫氧核糖核酸所需的酶量。
活性測定條件
20 mM Tris–HCl (pH 8.5)，30 mM NaCl，10 mM KCl，1 mM DTT，1.0 mM MnCl2，65℃ 溫育。
濃度：20U/μl
保存條件：-20℃保存
特點
? 特異性 3′ →5′ 單鏈DNA核酸外切活性
? 特異性 3′ →5′ 單鏈RNA核酸外切活性
? 熱穩定性酶，在高溫活性高于常溫
適用范圍
? 從3′ →5′方向降解單鏈DNA、單鏈RNA
? 去除線性雙鏈DNA的3'突出的單鏈末端（可能產生3種末端：3′平齊末端、1-5 個核苷酸的3′ 突出末端、1-5 個核苷酸3′ 凹陷末端）
產品包裝規格及組成
Component | AE2206A | AE2206B |
RecJ nuclease（5' to 3’） | 1kU | 5kU |
10× 耐熱RecJ nuclease Buffer | 1ml | 2ml |
質量控制
相關測試表明無外源內切脫氧核糖核酸酶污染。PCR方法檢測無宿主殘余DNA。
酶貯存緩沖液
10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA ，200 μg/ml BSA，50% Glycerol ，pH 8.0 @ 25°C。
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AE2201：Ec RecJ nuclease； AE2202：Ec exonuclease I
應用實例
1.去除PCR產物中的引物
1）按下表配制反應體系
反應組分 | 體積/ul |
10× Buffer | 5 |
PCR產物 | 40 |
耐熱RecJ nuclease (3’-5’) | 1 |
H2O | Variable |
總體積 | 50 |
2) 50-65°C反應30min；
3) 80°C加熱20min，使酶失活。
4) 進行后續實驗
警告: 本產品僅限科研實驗使用，臨床應用安全性和有效性未鑒定，不可用于醫療臨床診斷。
注意事項
l 本酶在AM Buffer B中也具有活性，且添加Mn2+可以提高活性
l 相比Mg2+，Mn2+對酶活性有顯著促進作用
l 對NaCl耐受度較低，高于50mM NaCl嚴重抑制酶活性，建議一價陽離子濃度不超過60mM
l 添加終濃度100 ug/ml BSA對酶活有一定促進作用
l 本酶不降解平末端雙鏈DNA
l 失活：苯酚-氯仿抽提去除RecJ核酸酶。加入終濃度50mM EDTA也能夠終止反應。
