RecA蛋白在基因重組中是不可缺少的,它參與DNA修復和紫外線誘導的突變。RecA促進lexA抑制子、umuD蛋白和lambda抑制子的自裂解。切割 LexA 能促進20多種基因的表達。體外研究證明:在ATP參與下,RecA促進單鏈DNA與同源雙鏈DNA發(fā)生鏈置換,需三步完成:
(1)RecA與單鏈DNA結(jié)合;(2)核蛋白絲結(jié)合到雙鏈DNA上尋找同源部分;(3)鏈置換。
本公司RecAf蛋白是重組表達,并經(jīng)多步純化的帶His標簽序列RecA重組蛋白,分子量 39.5 kDa。
活性定義
本品按質(zhì)量濃度銷售。
活性測定條件
70 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,5 mM DTT(pH 7.6 @ 25℃),37℃ 溫育。
濃度:2ug/μl
保存條件:-20℃可保存2年,避免反復凍融
特點與適用范圍
? 電鏡分析DNA結(jié)構(gòu)
? 用RecAf蛋白包被的探針來進行文庫篩選
? 在單個預先決定的位點切割DNA
? RecAf介導全長cDNA克隆的親合捕獲
產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成
Component | AE1907A | AE1907B | AE1907C |
RecAf蛋白 | 0.2mg | 1mg | 4mg |
10× RecA Buffer | 0.2ml | 0.5ml | 1.5ml |
質(zhì)量控制
經(jīng)過嚴格的質(zhì)控檢測,確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。
酶貯存緩沖液
10 mM Tris-HCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,50% Glycerol,pH 7.4 @ 25°C
使用實例:
1)按下表配制反應體系
反應組分 | 體積或濃度 |
10×Buffer | 2ul |
DNA底物 | Xul |
RecAf(2ug/μl) | 1-2ul |
H2O | Yul |
總體積 | 20ul |
2)37℃×30min反應,
3)非變性PAGE電泳檢測RecAf結(jié)合單鏈DNA底物活性,或按實驗目的進行后續(xù)操作。
警告: 本產(chǎn)品僅限科研實驗使用,臨床應用安全性和有效性未鑒定,不可用于醫(yī)療臨床診斷。
注意事項
l 熱失活:65℃加熱20分鐘。
l 本產(chǎn)品部分用途需要ATP參與,未提供ATP。